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菲亚——无血清培养基所对应细胞培养的适应

有两种方法可以使细胞适应无血清培养基(SFM):

1.直接适应法式—将细胞直接从添加血清的培养基转换到无血清培养基中。

2.连续适应或循序隔绝法—分几步将细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基中。与直接适应法相比较,连续适应法对于细胞更温和些。

为了使细胞适应无血清培养基,关键是细胞培养应满足以下条件:

1.处于对数生长中期

2.存活率大于90%

3.在适应期间,以较高的初始细胞接种量进行接种下面列出了常规适应步骤。初始细胞接种量、细胞产量和培养周期是连续优化的良好开端。

有些类型的细胞可以直接从含有血清培养基适应无血清培养基。对于直接适应,细胞接种量应在2.5 x 105 -3.5 x 105细胞/ml范围内,当细胞密度达到1 x 106-3 x 106细胞/ml时,传代培养细胞。培养4至7天后,当细胞密度达到2 x 106 -4 x 106细胞/ml时,细胞已完全适应了无血清培养基。当细胞密度达到1x 106 -3 x 106细胞/ml且存活率为90%时,应当每隔3到5天再次将适应了无血清培养基的贮存细胞在无血清培养基中进行传代培养。

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