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促卵泡素(FSH)elisa试剂盒试样规程,注意事项

   促卵泡素(FSH)elisa试剂盒试样规程:
  1、标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
  24IU/L5号标准品150*l的原倍标准品加入150*l标准品稀释液
  12IU/L4号标准品150*l的5号标准品加入150*l标准品稀释液
  6IU/L3号标准品150*l的4号标准品加入150*l标准品稀释液
  3IU/L2号标准品150*l的3号标准品加入150*l标准品稀释液
  1、5IU/L1号标准品150*l的2号标准品加入150*l标准品稀释液
  2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50*l,待测样品孔中先加样品稀释液40*l,然后再加待测样品10*l(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
  5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6、加酶:每孔加入酶标试剂50*l,空白孔除外。
  7、温育:操作同3。
  8、洗涤:操作同5。
  9、显色:每孔先加入显色剂A50*l,再加入显色剂B50*l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟、
  10、终止:每孔加终止液50*l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。
  计算
  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

促卵泡素(FSH)elisa试剂盒

  促卵泡素(FSH)elisa试剂盒注意事项
  1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
  2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  4.请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  5.底物请避光保存。
  6.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  7.本试剂不同批号组分不得混用。
  8.严格按照大鼠促卵泡生成素(FSH)elisa试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准、
  9.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
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