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怎样更好的利用ELISA试剂盒

   在ELISA试剂盒的使用过程中常见问题有很多加样器不确;尤其10ul以下的加样器,对结果影响极大;  保温设备不良;  洗涤用水不规范。

如何解决这些问题呢

1在使用过程校正加样器;10ul以下加样器最*采用进口产品(芬兰、法国等);

2 仔细校正温度到37,水浴箱为佳;  

3 必须使用去离子水或蒸馏水,不得用自来水、矿泉水等 

4 认真阅读使用说明书。  

样品加样  

1 加样不准确;没有混匀。  加样时一定要仔细。加样后,再检查,以防漏加、错加。  

2 加样后,反复抽吸3次混匀,防止血清聚集孔底,导致非特异性吸附。  洗涤  洗涤不彻底  每次注水洗涤,应静止30秒钟;选用吸水纸作为衬垫,每次洗涤后扣干孔内水分;

3 可选用塑料洗涤瓶。  加酶反应 漏加 滴加后,认真检查各孔  结果判断  包括阴性对照孔在内,各孔显色普遍偏深;②包括阳性对照在内,各孔均无显色;阳性对照不显色,而其它样本显色正常;

4 有些标本显色不深,判断阳性困难。  可能是洗涤不充分;加样过量;温育时间过长温度过高;按说明书重新操作。如无改善, 可与生产厂家联*;可能是漏加样本或酶液;温育时间过短温度过低;试剂保存不当活性下降;按说明书重新 操作。如无改善,可与生产厂家联*;③阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善,可与厂家联*,索要对照品; 重新操作。最*使用酶标仪,测定光吸收度,按P/N值标准判断。  ELISA试剂盒保存 保存不规范 一定要在2-8存放。不得过高,也不得冻存(冻存后,酶液将失效)。对照品为冻干品,按对照管标示,加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶,充分溶解混匀。可按说明书使用。

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