秒速赛车官网

技术文章
首页 >>> 技术文章 >>> 瘦素elisa试剂盒操作技巧及操作注意事项

瘦素elisa试剂盒操作技巧及操作注意事项

   瘦素elisa试剂盒应用于双抗体夹心法测定标本中人瘦素(leptin)水平。用纯化的人瘦素(leptin)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入瘦素(leptin),再与HRP标记的瘦素(leptin)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的瘦素(leptin)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人瘦素(leptin)浓度。
  瘦素elisa试剂盒操作技巧:
  1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
  2、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  3、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
  5、脱镁叶绿素a氧化酶酶免ELISA试剂盒保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
  瘦素elisa试剂盒操作注意事项
  1、当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
  2、请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。
  3、一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  4、洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
  5、如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
  6、底物请避光保存。
  7、在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
在线客服
电话
15061608254

中国环保在线

中级会员

中级会员

2

推荐收藏该企业网站

免责声明: 本站资料及图片来源互联网文章,本网不承担任何由内容信息所引起的争议和法律责任。所有作品版权归原创作者所有,与本站立场无关,如用户分享不慎侵犯了您的权益,请联系我们告知,我们将做删除处理!