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除去胎牛血清中脂肪酸的方法

胎牛血清是常见的实验室培养基营养液,在大部分试验中是不需要对胎牛血清中的脂肪酸进行去除的,但是,在进行某些特殊细胞培养的时候为了保证实验的准确性和我们要读胎牛血清中的某些成分进行去除,常见的脂肪酸去除,我们一般用一下方法。

1.溶解。取适量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸馏水中,溶解温度在23~27℃。 用浓度为0.2N的HCl,调节PH至3~3.5。

2.解析。充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中进行冰水浴,同时持续搅拌,维持30min。

3.吸附。加入5%的活性炭,混匀,混悬液将混悬液移至冰水混合物中进行冰水浴,同时持续搅拌,维持1小时。过滤,滤渣回收后再利用。

4.浓缩。 滤液用0.2N的NaOH调节PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超滤器进行超滤浓缩。

5.冻干。将浓缩液按冻干曲线冻干,即将超滤后的浓缩液迅速冷冻至-40℃,持续1小时左右,升到-25℃,持续10~20小时,再缓慢升温至0℃,维持1~4小时,升温至保存温度20℃,分装为成品。     

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