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抗血清的制备

抗血清指含有抗体的血清。传统的抗血清制备方法是将某种抗原通过多次注入动物,数十天后或数月后,采集动物血,立即分离出血清。此抗血清在保存或应用前必须作效价和特异性鉴定及纯化。

(一)免疫动物的选择  

免疫动物的选择基本要求:  

1.抗原与免疫动物的种属差异越远越好。  

2.动物必须适龄、健壮、无感染、体重合乎要求。  

3.不同动物对同一免疫原有不同的免疫应答表现。因此针对不同性质的免疫原,选用相应的动物。蛋白质抗原大部分动物皆适合;甾类激素多用家免;酶类多用豚鼠。  

4.抗血清要求:为R(rabbit)型或H(horse)型血清。R型抗血清是以家兔为代表的小型动物产生的抗血清,能和很小量抗原结合形成沉淀线,而H型抗血清则以马为代表的大型动物产生的抗血清,较少用于沉淀反应。

    此外需要制备大量免疫血清时,应选用马、绵羊等大动物;若需要量不多,则选用家兔、豚鼠和鸡等小动物。

(二)免疫方法及途径  

1.免疫原的注射剂量:应考虑抗原性强弱、分子量大小、动物的个体状态和免疫时间。抗体需要量多,时间间隔长,剂量可适当加大。  

2.免疫途径:通常有静脉、腹腔、肌肉、皮内、皮下、淋巴结及足掌等。若抗原宝贵可采用淋巴结内微量注射法;半抗原宜皮内多点注射。  

3.免疫方案:根据设计的目的要求、抗原性质、佐剂的种类来制定免疫方案。可采用全量免疫法、微量免疫法或混合免疫法。  

4.抗体产生阶段:可分静止期(约2天,血中尚无抗体);指数期(约4天左右,抗体迅速上升);稳定期(约2~4周,抗体保持一个稳定水平);下降期(约几个月后,此时抗体缓慢下降)四个阶段。

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